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紅景天組培快繁技術(shù)實(shí)例 · 含配方

紅景天:高山紅景天為景天科(Crassulaceae)多年生草本或亞灌木,是珍稀藥用植物之一。含有豐富的紅景天甙、黃酮、多種維生素和微量元素,還含有有機(jī)體所必需的17種氨基酸。



近幾十年的研究表明,紅景天具有抗缺氧、抗寒冷、抗疲勞、抗輻射、抗病毒等多種功能,還具有延緩機(jī)體衰老、防止老年疾病的功效,是一種適用于特殊地區(qū)的具有很大發(fā)展前途的對(duì)環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)的藥物。高山紅景天大多為天然資源,由于其生存環(huán)境惡劣,生長緩慢且年產(chǎn)量低,再加上需求量日益增大,使得原本就稀少的野生紅景天嚴(yán)重匱乏。通過組培快繁技術(shù),可解決紅景天種苗的供應(yīng)問題。

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無菌培養(yǎng)物的建立

1.1 外植體采集與消毒滅菌

采集紅景天幼嫩葉片為外植體誘導(dǎo)愈傷組織。在超凈工作臺(tái)上,先用70%酒精將紅景天幼嫩葉片浸泡30s,再用0.1%氯化汞浸泡2~3min,然后用無菌水沖洗3~5次,再用無菌濾紙將外植體表面的水吸干,將葉片切成約5mm2 大小的小塊,然后接種到不同激素濃度配比的培養(yǎng)基上。

1.2 啟動(dòng)培養(yǎng)

啟動(dòng)培養(yǎng)基是MS+蔗糖3%+瓊脂0.8%,pH為5.8。培養(yǎng)溫度為24~26℃,光照時(shí)間10~12h/d,光照強(qiáng)度1500~2000lx。

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繼代增殖培養(yǎng)

2.1 愈傷組織的培養(yǎng)

將已滅菌的葉片接種在MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.25mg/L的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,經(jīng)30d左右,外植體周圍產(chǎn)生大量的白綠色愈傷組織。愈傷組織不斷擴(kuò)大,并在其表面出現(xiàn)綠色突起。這些愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)到40d左右,綠色突起分化成芽,繼而發(fā)育成芽簇或苗叢,并且不斷產(chǎn)生綠色突起和叢生芽。

2.2 叢生芽的培養(yǎng)

小苗叢長到4~5cm時(shí),將小苗剪下轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上(一般每瓶能剪下6~10個(gè)小苗)。再將剪完小苗的培養(yǎng)瓶蓋好,繼續(xù)培養(yǎng)20~25d,培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的小芽簇又可長到4~5cm,此時(shí)又可剪下6~10個(gè)小苗,反復(fù)3~4次后,瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基營養(yǎng)和水分基本耗盡,將瓶?jī)?nèi)小芽叢取出,切成3~4塊,轉(zhuǎn)接到新鮮的分化培養(yǎng)基上。這樣反復(fù)培養(yǎng)下去,即可生產(chǎn)出成千上萬株試管苗。


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生根培養(yǎng)

將分化的苗叢取出轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上,14d左右即可生出3~4條小根。生根培養(yǎng)基以1/2MS、B5、White作基本培養(yǎng)基,附加IAA0.5mg/L效果較好,其中B5、White培養(yǎng)基生根效果優(yōu)于1/2MS。


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試管苗馴化移植

試管苗小根長到2~3cm時(shí),放入大棚或溫室內(nèi)閉瓶煉苗15d左右,然后將瓶蓋打開,3~5d后將小苗從瓶中取出,放入清水中洗凈培養(yǎng)基,栽入配制好的營養(yǎng)土中,營養(yǎng)土以珍珠巖和沙子1:1混合,用營養(yǎng)液澆透。移栽后用薄膜蓋好,保持80%相對(duì)濕度,5~7d后,逐步撤下薄膜,加強(qiáng)管理,15~20d即可移入大田定植。




編者按:本文來自曹春英主編《植物組織培養(yǎng)》,中國農(nóng)業(yè)出版社,由小編整理發(fā)布,如有不妥,敬請(qǐng)告知!


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